6176597: TCA生成能の低い麹菌及びその作出方法

概要

麹菌において2,4,6-トリクロロフェノール(TCP)から2,4,6-トリクロロアニソール(TCA)への変換に関与する酵素をコードする遺伝子を同定し、清酒のカビ臭の主要な原因物質であるTCAの生成を防止することができる新規な手段を提供すること。

請求項1

麹菌においてAO080521000231遺伝子の発現を低下又は欠失させることを含む、2,4,6-トリクロロアニソール生成能が低下した麹菌の作出方法であって、AO080521000231遺伝子は、配列番号2(省略)に示すアミノ酸配列、又は該配列において1～数個のアミノ酸が置換、欠失、挿入若しくは付加されたアミノ酸配列をコードし、かつ、そのゲノム配列が、配列番号3(省略)に示す塩基配列中の2001nt-3460ntと90%以上の同一性を有する遺伝子である、方法。

請求項2

麹菌ゲノム中のAO080521000231遺伝子を破壊することを含む請求項1記載の方法。

請求項3

AO080521000231遺伝子のコード領域よりも上流のゲノム部分領域と相同な領域からなる上流側相同領域と、AO080521000231遺伝子のコード領域よりも下流のゲノム部分領域と相同な領域からなる下流側相同領域とを含み、正常なAO080521000231遺伝子を含まないDNA断片を麹菌細胞に導入し、該DNA断片と麹菌ゲノムとの間で相同組換えを生じさせることによりAO080521000231遺伝子を破壊する請求項2記載の方法。

請求項4

前記上流側相同領域が、配列番号3(省略)に示す塩基配列中の1nt-2000ntの領域内の連続する500塩基以上の領域と相同な領域からなり、前記下流側相同領域が、配列番号3(省略)に示す塩基配列中の3461nt-5460ntの領域内の連続する500塩基以上の領域と相同な領域からなる請求項3記載の方法。

請求項5

配列番号2(省略)に示すアミノ酸配列、又は該配列において1～数個のアミノ酸が置換、欠失、挿入若しくは付加されたアミノ酸配列をコードし、かつ、そのゲノム配列が、配列番号3(省略)に示す塩基配列中の2001nt-3460ntと90%以上の同一性を有する遺伝子であるAO080521000231遺伝子の発現が低下又は欠失している、2,4,6-トリクロロアニソール生成能の低い麹菌。

請求項6

AO080521000231遺伝子が破壊されたゲノムを有する請求項5記載の麹菌。

請求項7

配列番号3(省略)に示す塩基配列中の1nt-2000ntの領域内の連続する500塩基以上の領域と相同な領域からなる上流側相同領域と、配列番号3(省略)に示す塩基配列中の3461nt-5460ntの領域内の連続する500塩基以上の領域と相同な領域からなる下流側相同領域とを含み、正常なAO080521000231遺伝子を含まないDNA断片であって、AO080521000231遺伝子は、配列番号2(省略)に示すアミノ酸配列、又は該配列において1～数個のアミノ酸が置換、欠失、挿入若しくは付加されたアミノ酸配列をコードし、かつ、そのゲノム配列が、配列番号3(省略)に示す塩基配列中の2001nt-3460ntと90%以上の同一性を有する遺伝子である、DNA断片。

請求項8

請求項5又は6記載の麹菌を繁殖させた麹を原料として用いて清酒を製造することを含む、2,4,6-トリクロロアニソール含量の低い清酒の製造方法。